bcftools/call1.c

   1 #include <unistd.h>
   2 #include <stdlib.h>
   3 #include <math.h>
   4 #include <zlib.h>
   5 #include <errno.h>
   6 #include "bcf.h"
   7 #include "prob1.h"
   8 #include "kstring.h"
   9
  10 #include "khash.h"
  11 KHASH_SET_INIT_INT64(set64)
  12
  13 #include "kseq.h"
  14 KSTREAM_INIT(gzFile, gzread, 16384)
  15
  16 #define VC_NO_GENO 2
  17 #define VC_BCFOUT  4
  18 #define VC_CALL    8
  19 #define VC_VARONLY 16
  20 #define VC_VCFIN   32
  21 #define VC_UNCOMP  64
  22 #define VC_HWE     128
  23 #define VC_KEEPALT 256
  24 #define VC_ACGT_ONLY 512
  25 #define VC_QCALL   1024
  26 #define VC_CALL_GT 2048
  27 #define VC_ADJLD   4096
  28
  29 typedef struct {
  30         int flag, prior_type, n1;
  31         char *fn_list, *prior_file;
  32         double theta, pref;
  33 } viewconf_t;
  34
  35 khash_t(set64) *bcf_load_pos(const char *fn, bcf_hdr_t *_h)
  36 {
  37         void *str2id;
  38         gzFile fp;
  39         kstream_t *ks;
  40         int ret, dret, lineno = 1;
  41         kstring_t *str;
  42         khash_t(set64) *hash = 0;
  43
  44         hash = kh_init(set64);
  45         str2id = bcf_build_refhash(_h);
  46         str = calloc(1, sizeof(kstring_t));
  47         fp = strcmp(fn, "-")? gzopen(fn, "r") : gzdopen(fileno(stdin), "r");
  48         ks = ks_init(fp);
  49         while (ks_getuntil(ks, 0, str, &dret) >= 0) {
  50                 int tid = bcf_str2id(str2id, str->s);
  51                 if (tid >= 0 && dret != '\n') {
  52                         if (ks_getuntil(ks, 0, str, &dret) >= 0) {
  53                                 uint64_t x = (uint64_t)tid<<32 | (atoi(str->s) - 1);
  54                                 kh_put(set64, hash, x, &ret);
  55                         } else break;
  56                 } else fprintf(stderr, "[%s] %s is not a reference name (line %d).\n", __func__, str->s, lineno);
  57                 if (dret != '\n') while ((dret = ks_getc(ks)) > 0 && dret != '\n');
  58                 if (dret < 0) break;
  59                 ++lineno;
  60         }
  61         bcf_str2id_destroy(str2id);
  62         ks_destroy(ks);
  63         gzclose(fp);
  64         free(str->s); free(str);
  65         return hash;
  66 }
  67
  68 static double test_hwe(const double g[3])
  69 {
  70         extern double kf_gammaq(double p, double x);
  71         double fexp, chi2, f[3], n;
  72         int i;
  73         n = g[0] + g[1] + g[2];
  74         fexp = (2. * g[2] + g[1]) / (2. * n);
  75         if (fexp > 1. - 1e-10) fexp = 1. - 1e-10;
  76         if (fexp < 1e-10) fexp = 1e-10;
  77         f[0] = n * (1. - fexp) * (1. - fexp);
  78         f[1] = n * 2. * fexp * (1. - fexp);
  79         f[2] = n * fexp * fexp;
  80         for (i = 0, chi2 = 0.; i < 3; ++i)
  81                 chi2 += (g[i] - f[i]) * (g[i] - f[i]) / f[i];
  82         return kf_gammaq(.5, chi2 / 2.);
  83 }
  84
  85 typedef struct {
  86         double p[4];
  87         int mq, depth, is_tested, d[4];
  88 } anno16_t;
  89
  90 static double ttest(int n1, int n2, int a[4])
  91 {
  92         extern double kf_betai(double a, double b, double x);
  93         double t, v, u1, u2;
  94         if (n1 == 0 || n2 == 0 || n1 + n2 < 3) return 1.0;
  95         u1 = (double)a[0] / n1; u2 = (double)a[2] / n2;
  96         if (u1 <= u2) return 1.;
  97         t = (u1 - u2) / sqrt(((a[1] - n1 * u1 * u1) + (a[3] - n2 * u2 * u2)) / (n1 + n2 - 2) * (1./n1 + 1./n2));
  98         v = n1 + n2 - 2;
  99 //      printf("%d,%d,%d,%d,%lf,%lf,%lf\n", a[0], a[1], a[2], a[3], t, u1, u2);
 100         return t < 0.? 1. : .5 * kf_betai(.5*v, .5, v/(v+t*t));
 101 }
 102
 103 static int test16_core(int anno[16], anno16_t *a)
 104 {
 105         extern double kt_fisher_exact(int n11, int n12, int n21, int n22, double *_left, double *_right, double *two);
 106         double left, right;
 107         int i;
 108         a->p[0] = a->p[1] = a->p[2] = a->p[3] = 1.;
 109         memcpy(a->d, anno, 4 * sizeof(int));
 110         a->depth = anno[0] + anno[1] + anno[2] + anno[3];
 111         a->is_tested = (anno[0] + anno[1] > 0 && anno[2] + anno[3] > 0);
 112         if (a->depth == 0) return -1;
 113         a->mq = (int)(sqrt((anno[9] + anno[11]) / a->depth) + .499);
 114         kt_fisher_exact(anno[0], anno[1], anno[2], anno[3], &left, &right, &a->p[0]);
 115         for (i = 1; i < 4; ++i)
 116                 a->p[i] = ttest(anno[0] + anno[1], anno[2] + anno[3], anno+4*i);
 117         return 0;
 118 }
 119
 120 static int test16(bcf1_t *b, anno16_t *a)
 121 {
 122         char *p;
 123         int i, anno[16];
 124         a->p[0] = a->p[1] = a->p[2] = a->p[3] = 1.;
 125         a->d[0] = a->d[1] = a->d[2] = a->d[3] = 0.;
 126         a->mq = a->depth = a->is_tested = 0;
 127         if ((p = strstr(b->info, "I16=")) == 0) return -1;
 128         p += 4;
 129         for (i = 0; i < 16; ++i) {
 130                 anno[i] = strtol(p, &p, 10);
 131                 if (anno[i] == 0 && (errno == EINVAL || errno == ERANGE)) return -2;
 132                 ++p;
 133         }
 134         return test16_core(anno, a);
 135 }
 136
 137 static void rm_info(bcf1_t *b, const char *key)
 138 {
 139         char *p, *q;
 140         if ((p = strstr(b->info, key)) == 0) return;
 141         for (q = p; *q && *q != ';'; ++q);
 142         if (p > b->info && *(p-1) == ';') --p;
 143         memmove(p, q, b->l_str - (q - b->str));
 144         b->l_str -= q - p;
 145         bcf_sync(b);
 146 }
 147
 148 static int update_bcf1(int n_smpl, bcf1_t *b, const bcf_p1aux_t *pa, const bcf_p1rst_t *pr, double pref, int flag)
 149 {
 150         kstring_t s;
 151         int is_var = (pr->p_ref < pref);
 152         double p_hwe, r = is_var? pr->p_ref : 1. - pr->p_ref;
 153         anno16_t a;
 154
 155         p_hwe = pr->g[0] >= 0.? test_hwe(pr->g) : 1.0; // only do HWE g[] is calculated
 156         test16(b, &a);
 157         rm_info(b, "I16=");
 158
 159         memset(&s, 0, sizeof(kstring_t));
 160         kputc('\0', &s); kputs(b->ref, &s); kputc('\0', &s);
 161         kputs(b->alt, &s); kputc('\0', &s); kputc('\0', &s);
 162         kputs(b->info, &s);
 163         if (b->info[0]) kputc(';', &s);
 164 //      ksprintf(&s, "AF1=%.4lg;AFE=%.4lg;CI95=%.4lg,%.4lg", 1.-pr->f_em, 1.-pr->f_exp, pr->cil, pr->cih);
 165         ksprintf(&s, "AF1=%.4lg;CI95=%.4lg,%.4lg", 1.-pr->f_em, pr->cil, pr->cih);
 166         ksprintf(&s, ";DP4=%d,%d,%d,%d;MQ=%d", a.d[0], a.d[1], a.d[2], a.d[3], a.mq);
 167         if (a.is_tested) {
 168                 if (pr->pc[0] >= 0.) ksprintf(&s, ";PC4=%lg,%lg,%lg,%lg", pr->pc[0], pr->pc[1], pr->pc[2], pr->pc[3]);
 169                 ksprintf(&s, ";PV4=%.2lg,%.2lg,%.2lg,%.2lg", a.p[0], a.p[1], a.p[2], a.p[3]);
 170         }
 171         if (pr->g[0] >= 0. && p_hwe <= .2)
 172                 ksprintf(&s, ";GC=%.2lf,%.2lf,%.2lf;HWE=%.3lf", pr->g[2], pr->g[1], pr->g[0], p_hwe);
 173         kputc('\0', &s);
 174         kputs(b->fmt, &s); kputc('\0', &s);
 175         free(b->str);
 176         b->m_str = s.m; b->l_str = s.l; b->str = s.s;
 177         b->qual = r < 1e-100? 99 : -4.343 * log(r);
 178         if (b->qual > 99) b->qual = 99;
 179         bcf_sync(b);
 180         if (!is_var) bcf_shrink_alt(b, 1);
 181         else if (!(flag&VC_KEEPALT))
 182                 bcf_shrink_alt(b, pr->rank0 < 2? 2 : pr->rank0+1);
 183         if (is_var && (flag&VC_CALL_GT)) { // call individual genotype
 184                 int i, x, old_n_gi = b->n_gi;
 185                 s.m = b->m_str; s.l = b->l_str - 1; s.s = b->str;
 186                 kputs(":GT:GQ", &s); kputc('\0', &s);
 187                 b->m_str = s.m; b->l_str = s.l; b->str = s.s;
 188                 bcf_sync(b);
 189                 for (i = 0; i < b->n_smpl; ++i) {
 190                         x = bcf_p1_call_gt(pa, pr->f_em, i);
 191                         ((uint8_t*)b->gi[old_n_gi].data)[i] = (x&3) == 0? 1<<3|1 : (x&3) == 1? 1 : 0;
 192                         ((uint8_t*)b->gi[old_n_gi+1].data)[i] = x>>2;
 193                 }
 194         }
 195         return is_var;
 196 }
 197
 198 double bcf_ld_freq(const bcf1_t *b0, const bcf1_t *b1, double f[4]);
 199
 200 int bcfview(int argc, char *argv[])
 201 {
 202         extern int bcf_2qcall(bcf_hdr_t *h, bcf1_t *b);
 203         bcf_t *bp, *bout = 0;
 204         bcf1_t *b, *blast;
 205         int c;
 206         uint64_t n_processed = 0;
 207         viewconf_t vc;
 208         bcf_p1aux_t *p1 = 0;
 209         bcf_hdr_t *h;
 210         int tid, begin, end;
 211         char moder[4], modew[4];
 212         khash_t(set64) *hash = 0;
 213
 214         tid = begin = end = -1;
 215         memset(&vc, 0, sizeof(viewconf_t));
 216         vc.prior_type = vc.n1 = -1; vc.theta = 1e-3; vc.pref = 0.5;
 217         while ((c = getopt(argc, argv, "N1:l:cHAGvbSuP:t:p:QgL")) >= 0) {
 218                 switch (c) {
 219                 case '1': vc.n1 = atoi(optarg); break;
 220                 case 'l': vc.fn_list = strdup(optarg); break;
 221                 case 'N': vc.flag |= VC_ACGT_ONLY; break;
 222                 case 'G': vc.flag |= VC_NO_GENO; break;
 223                 case 'A': vc.flag |= VC_KEEPALT; break;
 224                 case 'b': vc.flag |= VC_BCFOUT; break;
 225                 case 'S': vc.flag |= VC_VCFIN; break;
 226                 case 'c': vc.flag |= VC_CALL; break;
 227                 case 'v': vc.flag |= VC_VARONLY | VC_CALL; break;
 228                 case 'u': vc.flag |= VC_UNCOMP | VC_BCFOUT; break;
 229                 case 'H': vc.flag |= VC_HWE; break;
 230                 case 'g': vc.flag |= VC_CALL_GT | VC_CALL; break;
 231                 case 't': vc.theta = atof(optarg); break;
 232                 case 'p': vc.pref = atof(optarg); break;
 233                 case 'Q': vc.flag |= VC_QCALL; break;
 234                 case 'L': vc.flag |= VC_ADJLD; break;
 235                 case 'P':
 236                         if (strcmp(optarg, "full") == 0) vc.prior_type = MC_PTYPE_FULL;
 237                         else if (strcmp(optarg, "cond2") == 0) vc.prior_type = MC_PTYPE_COND2;
 238                         else if (strcmp(optarg, "flat") == 0) vc.prior_type = MC_PTYPE_FLAT;
 239                         else vc.prior_file = strdup(optarg);
 240                         break;
 241                 }
 242         }
 243         if (argc == optind) {
 244                 fprintf(stderr, "\n");
 245                 fprintf(stderr, "Usage:   bcftools view [options] <in.bcf> [reg]\n\n");
 246                 fprintf(stderr, "Options: -c        SNP calling\n");
 247                 fprintf(stderr, "         -v        output potential variant sites only (force -c)\n");
 248                 fprintf(stderr, "         -g        call genotypes at variant sites (force -c)\n");
 249                 fprintf(stderr, "         -b        output BCF instead of VCF\n");
 250                 fprintf(stderr, "         -u        uncompressed BCF output (force -b)\n");
 251                 fprintf(stderr, "         -S        input is VCF\n");
 252                 fprintf(stderr, "         -A        keep all possible alternate alleles at variant sites\n");
 253                 fprintf(stderr, "         -G        suppress all individual genotype information\n");
 254                 fprintf(stderr, "         -H        perform Hardy-Weinberg test (slower)\n");
 255                 fprintf(stderr, "         -N        skip sites where REF is not A/C/G/T\n");
 256                 fprintf(stderr, "         -Q        output the QCALL likelihood format\n");
 257                 fprintf(stderr, "         -L        calculate LD for adjacent sites\n");
 258                 fprintf(stderr, "         -1 INT    number of group-1 samples [0]\n");
 259                 fprintf(stderr, "         -l FILE   list of sites to output [all sites]\n");
 260                 fprintf(stderr, "         -t FLOAT  scaled mutation rate [%.4lg]\n", vc.theta);
 261                 fprintf(stderr, "         -p FLOAT  variant if P(ref|D)<FLOAT [%.3lg]\n", vc.pref);
 262                 fprintf(stderr, "         -P STR    type of prior: full, cond2, flat [full]\n");
 263                 fprintf(stderr, "\n");
 264                 return 1;
 265         }
 266
 267         b = calloc(1, sizeof(bcf1_t));
 268         blast = calloc(1, sizeof(bcf1_t));
 269         strcpy(moder, "r");
 270         if (!(vc.flag & VC_VCFIN)) strcat(moder, "b");
 271         strcpy(modew, "w");
 272         if (vc.flag & VC_BCFOUT) strcat(modew, "b");
 273         if (vc.flag & VC_UNCOMP) strcat(modew, "u");
 274         bp = vcf_open(argv[optind], moder);
 275         h = vcf_hdr_read(bp);
 276         bout = vcf_open("-", modew);
 277         if (!(vc.flag & VC_QCALL)) vcf_hdr_write(bout, h);
 278         if (vc.flag & VC_CALL) {
 279                 p1 = bcf_p1_init(h->n_smpl);
 280                 if (vc.prior_file) {
 281                         if (bcf_p1_read_prior(p1, vc.prior_file) < 0) {
 282                                 fprintf(stderr, "[%s] fail to read the prior AFS.\n", __func__);
 283                                 return 1;
 284                         }
 285                 } else bcf_p1_init_prior(p1, vc.prior_type, vc.theta);
 286                 if (vc.n1 > 0) {
 287                         bcf_p1_set_n1(p1, vc.n1);
 288                         bcf_p1_init_subprior(p1, vc.prior_type, vc.theta);
 289                 }
 290         }
 291         if (vc.fn_list) hash = bcf_load_pos(vc.fn_list, h);
 292         if (optind + 1 < argc && !(vc.flag&VC_VCFIN)) {
 293                 void *str2id = bcf_build_refhash(h);
 294                 if (bcf_parse_region(str2id, argv[optind+1], &tid, &begin, &end) >= 0) {
 295                         bcf_idx_t *idx;
 296                         idx = bcf_idx_load(argv[optind]);
 297                         if (idx) {
 298                                 uint64_t off;
 299                                 off = bcf_idx_query(idx, tid, begin);
 300                                 if (off == 0) {
 301                                         fprintf(stderr, "[%s] no records in the query region.\n", __func__);
 302                                         return 1; // FIXME: a lot of memory leaks...
 303                                 }
 304                                 bgzf_seek(bp->fp, off, SEEK_SET);
 305                                 bcf_idx_destroy(idx);
 306                         }
 307                 }
 308         }
 309         while (vcf_read(bp, h, b) > 0) {
 310                 if (vc.flag & VC_ACGT_ONLY) {
 311                         int x;
 312                         if (b->ref[0] == 0 || b->ref[1] != 0) continue;
 313                         x = toupper(b->ref[0]);
 314                         if (x != 'A' && x != 'C' && x != 'G' && x != 'T') continue;
 315                 }
 316                 if (hash) {
 317                         uint64_t x = (uint64_t)b->tid<<32 | b->pos;
 318                         khint_t k = kh_get(set64, hash, x);
 319                         if (kh_size(hash) == 0) break;
 320                         if (k == kh_end(hash)) continue;
 321                         kh_del(set64, hash, k);
 322                 }
 323                 if (tid >= 0) {
 324                         int l = strlen(b->ref);
 325                         l = b->pos + (l > 0? l : 1);
 326                         if (b->tid != tid || b->pos >= end) break;
 327                         if (!(l > begin && end > b->pos)) continue;
 328                 }
 329                 ++n_processed;
 330                 if (vc.flag & VC_QCALL) { // output QCALL format; STOP here
 331                         bcf_2qcall(h, b);
 332                         continue;
 333                 }
 334                 if (vc.flag & (VC_CALL|VC_ADJLD)) bcf_gl2pl(b);
 335                 if (vc.flag & VC_CALL) { // call variants
 336                         bcf_p1rst_t pr;
 337                         bcf_p1_cal(b, p1, &pr); // pr.g[3] is not calculated here
 338                         if (vc.flag&VC_HWE) bcf_p1_cal_g3(p1, pr.g);
 339                         if (n_processed % 100000 == 0) {
 340                                 fprintf(stderr, "[%s] %ld sites processed.\n", __func__, (long)n_processed);
 341                                 bcf_p1_dump_afs(p1);
 342                         }
 343                         if (pr.p_ref >= vc.pref && (vc.flag & VC_VARONLY)) continue;
 344                         update_bcf1(h->n_smpl, b, p1, &pr, vc.pref, vc.flag);
 345                 }
 346                 if (vc.flag & VC_ADJLD) { // compute LD
 347                         double f[4], r2;
 348                         if ((r2 = bcf_ld_freq(blast, b, f)) >= 0) {
 349                                 kstring_t s;
 350                                 s.m = s.l = 0; s.s = 0;
 351                                 if (*b->info) kputc(';', &s);
 352                                 ksprintf(&s, "NEIR=%.3lf;NEIF=%.3lf,%.3lf", r2, f[0]+f[2], f[0]+f[1]);
 353                                 bcf_append_info(b, s.s, s.l);
 354                                 free(s.s);
 355                         }
 356                         bcf_cpy(blast, b);
 357                 }
 358                 if (vc.flag & VC_NO_GENO) { // do not output GENO fields
 359                         b->n_gi = 0;
 360                         b->fmt[0] = '\0';
 361                 }
 362                 vcf_write(bout, h, b);
 363         }
 364         if (vc.prior_file) free(vc.prior_file);
 365         if (vc.flag & VC_CALL) bcf_p1_dump_afs(p1);
 366         bcf_hdr_destroy(h);
 367         bcf_destroy(b); bcf_destroy(blast);
 368         vcf_close(bp); vcf_close(bout);
 369         if (hash) kh_destroy(set64, hash);
 370         if (vc.fn_list) free(vc.fn_list);
 371         if (p1) bcf_p1_destroy(p1);
 372         return 0;
 373 }