bam_sort.c

   1 #include <stdlib.h>
   2 #include <ctype.h>
   3 #include <assert.h>
   4 #include <errno.h>
   5 #include <stdio.h>
   6 #include <string.h>
   7 #include <unistd.h>
   8 #include "bam.h"
   9 #include "ksort.h"
  10
  11 static int g_is_by_qname = 0;
  12
  13 static int strnum_cmp(const char *_a, const char *_b)
  14 {
  15         const unsigned char *a = (const unsigned char*)_a, *b = (const unsigned char*)_b;
  16         const unsigned char *pa = a, *pb = b;
  17         while (*pa && *pb) {
  18                 if (isdigit(*pa) && isdigit(*pb)) {
  19                         while (*pa == '0') ++pa;
  20                         while (*pb == '0') ++pb;
  21                         while (isdigit(*pa) && isdigit(*pb) && *pa == *pb) ++pa, ++pb;
  22                         if (isdigit(*pa) && isdigit(*pb)) {
  23                                 int i = 0;
  24                                 while (isdigit(pa[i]) && isdigit(pb[i])) ++i;
  25                                 return isdigit(pa[i])? 1 : isdigit(pb[i])? -1 : (int)*pa - (int)*pb;
  26                         } else if (isdigit(*pa)) return 1;
  27                         else if (isdigit(*pb)) return -1;
  28                         else if (pa - a != pb - b) return pa - a < pb - b? 1 : -1;
  29                 } else {
  30                         if (*pa != *pb) return (int)*pa - (int)*pb;
  31                         ++pa; ++pb;
  32                 }
  33         }
  34         return *pa? 1 : *pb? -1 : 0;
  35 }
  36
  37 #define HEAP_EMPTY 0xffffffffffffffffull
  38
  39 typedef struct {
  40         int i;
  41         uint64_t pos, idx;
  42         bam1_t *b;
  43 } heap1_t;
  44
  45 #define __pos_cmp(a, b) ((a).pos > (b).pos || ((a).pos == (b).pos && ((a).i > (b).i || ((a).i == (b).i && (a).idx > (b).idx))))
  46
  47 static inline int heap_lt(const heap1_t a, const heap1_t b)
  48 {
  49         if (g_is_by_qname) {
  50                 int t;
  51                 if (a.b == 0 || b.b == 0) return a.b == 0? 1 : 0;
  52                 t = strnum_cmp(bam1_qname(a.b), bam1_qname(b.b));
  53                 return (t > 0 || (t == 0 && __pos_cmp(a, b)));
  54         } else return __pos_cmp(a, b);
  55 }
  56
  57 KSORT_INIT(heap, heap1_t, heap_lt)
  58
  59 static void swap_header_targets(bam_header_t *h1, bam_header_t *h2)
  60 {
  61         bam_header_t t;
  62         t.n_targets = h1->n_targets, h1->n_targets = h2->n_targets, h2->n_targets = t.n_targets;
  63         t.target_name = h1->target_name, h1->target_name = h2->target_name, h2->target_name = t.target_name;
  64         t.target_len = h1->target_len, h1->target_len = h2->target_len, h2->target_len = t.target_len;
  65 }
  66
  67 static void swap_header_text(bam_header_t *h1, bam_header_t *h2)
  68 {
  69         int tempi;
  70         char *temps;
  71         tempi = h1->l_text, h1->l_text = h2->l_text, h2->l_text = tempi;
  72         temps = h1->text, h1->text = h2->text, h2->text = temps;
  73 }
  74
  75 #define MERGE_RG     1
  76 #define MERGE_UNCOMP 2
  77 #define MERGE_LEVEL1 4
  78 #define MERGE_FORCE  8
  79
  80 /*!
  81   @abstract    Merge multiple sorted BAM.
  82   @param  is_by_qname whether to sort by query name
  83   @param  out  output BAM file name
  84   @param  headers  name of SAM file from which to copy '@' header lines,
  85                    or NULL to copy them from the first file to be merged
  86   @param  n    number of files to be merged
  87   @param  fn   names of files to be merged
  88
  89   @discussion Padding information may NOT correctly maintained. This
  90   function is NOT thread safe.
  91  */
  92 int bam_merge_core2(int by_qname, const char *out, const char *headers, int n, char * const *fn, int flag, const char *reg, int n_threads)
  93 {
  94         bamFile fpout, *fp;
  95         heap1_t *heap;
  96         bam_header_t *hout = 0;
  97         bam_header_t *hheaders = NULL;
  98         int i, j, *RG_len = 0;
  99         uint64_t idx = 0;
 100         char **RG = 0;
 101         bam_iter_t *iter = 0;
 102
 103         if (headers) {
 104                 tamFile fpheaders = sam_open(headers);
 105                 if (fpheaders == 0) {
 106                         const char *message = strerror(errno);
 107                         fprintf(stderr, "[bam_merge_core] cannot open '%s': %s\n", headers, message);
 108                         return -1;
 109                 }
 110                 hheaders = sam_header_read(fpheaders);
 111                 sam_close(fpheaders);
 112         }
 113
 114         g_is_by_qname = by_qname;
 115         fp = (bamFile*)calloc(n, sizeof(bamFile));
 116         heap = (heap1_t*)calloc(n, sizeof(heap1_t));
 117         iter = (bam_iter_t*)calloc(n, sizeof(bam_iter_t));
 118         // prepare RG tag
 119         if (flag & MERGE_RG) {
 120                 RG = (char**)calloc(n, sizeof(void*));
 121                 RG_len = (int*)calloc(n, sizeof(int));
 122                 for (i = 0; i != n; ++i) {
 123                         int l = strlen(fn[i]);
 124                         const char *s = fn[i];
 125                         if (l > 4 && strcmp(s + l - 4, ".bam") == 0) l -= 4;
 126                         for (j = l - 1; j >= 0; --j) if (s[j] == '/') break;
 127                         ++j; l -= j;
 128                         RG[i] = calloc(l + 1, 1);
 129                         RG_len[i] = l;
 130                         strncpy(RG[i], s + j, l);
 131                 }
 132         }
 133         // read the first
 134         for (i = 0; i != n; ++i) {
 135                 bam_header_t *hin;
 136                 fp[i] = bam_open(fn[i], "r");
 137                 if (fp[i] == 0) {
 138                         int j;
 139                         fprintf(stderr, "[bam_merge_core] fail to open file %s\n", fn[i]);
 140                         for (j = 0; j < i; ++j) bam_close(fp[j]);
 141                         free(fp); free(heap);
 142                         // FIXME: possible memory leak
 143                         return -1;
 144                 }
 145                 hin = bam_header_read(fp[i]);
 146                 if (i == 0) { // the first BAM
 147                         hout = hin;
 148                 } else { // validate multiple baf
 149                         int min_n_targets = hout->n_targets;
 150                         if (hin->n_targets < min_n_targets) min_n_targets = hin->n_targets;
 151
 152                         for (j = 0; j < min_n_targets; ++j)
 153                                 if (strcmp(hout->target_name[j], hin->target_name[j]) != 0) {
 154                                         fprintf(stderr, "[bam_merge_core] different target sequence name: '%s' != '%s' in file '%s'\n",
 155                                                         hout->target_name[j], hin->target_name[j], fn[i]);
 156                                         return -1;
 157                                 }
 158
 159                         // If this input file has additional target reference sequences,
 160                         // add them to the headers to be output
 161                         if (hin->n_targets > hout->n_targets) {
 162                                 swap_header_targets(hout, hin);
 163                                 // FIXME Possibly we should also create @SQ text headers
 164                                 // for the newly added reference sequences
 165                         }
 166
 167                         bam_header_destroy(hin);
 168                 }
 169         }
 170
 171         if (hheaders) {
 172                 // If the text headers to be swapped in include any @SQ headers,
 173                 // check that they are consistent with the existing binary list
 174                 // of reference information.
 175                 if (hheaders->n_targets > 0) {
 176                         if (hout->n_targets != hheaders->n_targets) {
 177                                 fprintf(stderr, "[bam_merge_core] number of @SQ headers in '%s' differs from number of target sequences\n", headers);
 178                                 if (!reg) return -1;
 179                         }
 180                         for (j = 0; j < hout->n_targets; ++j)
 181                                 if (strcmp(hout->target_name[j], hheaders->target_name[j]) != 0) {
 182                                         fprintf(stderr, "[bam_merge_core] @SQ header '%s' in '%s' differs from target sequence\n", hheaders->target_name[j], headers);
 183                                         if (!reg) return -1;
 184                                 }
 185                 }
 186
 187                 swap_header_text(hout, hheaders);
 188                 bam_header_destroy(hheaders);
 189         }
 190
 191         if (reg) {
 192                 int tid, beg, end;
 193                 if (bam_parse_region(hout, reg, &tid, &beg, &end) < 0) {
 194                         fprintf(stderr, "[%s] Malformated region string or undefined reference name\n", __func__);
 195                         return -1;
 196                 }
 197                 for (i = 0; i < n; ++i) {
 198                         bam_index_t *idx;
 199                         idx = bam_index_load(fn[i]);
 200                         iter[i] = bam_iter_query(idx, tid, beg, end);
 201                         bam_index_destroy(idx);
 202                 }
 203         }
 204
 205         for (i = 0; i < n; ++i) {
 206                 heap1_t *h = heap + i;
 207                 h->i = i;
 208                 h->b = (bam1_t*)calloc(1, sizeof(bam1_t));
 209                 if (bam_iter_read(fp[i], iter[i], h->b) >= 0) {
 210                         h->pos = ((uint64_t)h->b->core.tid<<32) | (uint32_t)((int32_t)h->b->core.pos+1)<<1 | bam1_strand(h->b);
 211                         h->idx = idx++;
 212                 }
 213                 else h->pos = HEAP_EMPTY;
 214         }
 215         if (flag & MERGE_UNCOMP) fpout = strcmp(out, "-")? bam_open(out, "wu") : bam_dopen(fileno(stdout), "wu");
 216         else if (flag & MERGE_LEVEL1) fpout = strcmp(out, "-")? bam_open(out, "w1") : bam_dopen(fileno(stdout), "w1");
 217         else fpout = strcmp(out, "-")? bam_open(out, "w") : bam_dopen(fileno(stdout), "w");
 218         if (fpout == 0) {
 219                 fprintf(stderr, "[%s] fail to create the output file.\n", __func__);
 220                 return -1;
 221         }
 222         bam_header_write(fpout, hout);
 223         bam_header_destroy(hout);
 224         if (!(flag & MERGE_UNCOMP)) bgzf_mt(fpout, n_threads, 256);
 225
 226         ks_heapmake(heap, n, heap);
 227         while (heap->pos != HEAP_EMPTY) {
 228                 bam1_t *b = heap->b;
 229                 if (flag & MERGE_RG) {
 230                         uint8_t *rg = bam_aux_get(b, "RG");
 231                         if (rg) bam_aux_del(b, rg);
 232                         bam_aux_append(b, "RG", 'Z', RG_len[heap->i] + 1, (uint8_t*)RG[heap->i]);
 233                 }
 234                 bam_write1_core(fpout, &b->core, b->data_len, b->data);
 235                 if ((j = bam_iter_read(fp[heap->i], iter[heap->i], b)) >= 0) {
 236                         heap->pos = ((uint64_t)b->core.tid<<32) | (uint32_t)((int)b->core.pos+1)<<1 | bam1_strand(b);
 237                         heap->idx = idx++;
 238                 } else if (j == -1) {
 239                         heap->pos = HEAP_EMPTY;
 240                         free(heap->b->data); free(heap->b);
 241                         heap->b = 0;
 242                 } else fprintf(stderr, "[bam_merge_core] '%s' is truncated. Continue anyway.\n", fn[heap->i]);
 243                 ks_heapadjust(heap, 0, n, heap);
 244         }
 245
 246         if (flag & MERGE_RG) {
 247                 for (i = 0; i != n; ++i) free(RG[i]);
 248                 free(RG); free(RG_len);
 249         }
 250         for (i = 0; i != n; ++i) {
 251                 bam_iter_destroy(iter[i]);
 252                 bam_close(fp[i]);
 253         }
 254         bam_close(fpout);
 255         free(fp); free(heap); free(iter);
 256         return 0;
 257 }
 258
 259 int bam_merge_core(int by_qname, const char *out, const char *headers, int n, char * const *fn, int flag, const char *reg)
 260 {
 261         return bam_merge_core2(by_qname, out, headers, n, fn, flag, reg, 0);
 262 }
 263
 264 int bam_merge(int argc, char *argv[])
 265 {
 266         int c, is_by_qname = 0, flag = 0, ret = 0, n_threads = 0;
 267         char *fn_headers = NULL, *reg = 0;
 268
 269         while ((c = getopt(argc, argv, "h:nru1R:f@:")) >= 0) {
 270                 switch (c) {
 271                 case 'r': flag |= MERGE_RG; break;
 272                 case 'f': flag |= MERGE_FORCE; break;
 273                 case 'h': fn_headers = strdup(optarg); break;
 274                 case 'n': is_by_qname = 1; break;
 275                 case '1': flag |= MERGE_LEVEL1; break;
 276                 case 'u': flag |= MERGE_UNCOMP; break;
 277                 case 'R': reg = strdup(optarg); break;
 278                 case '@': n_threads = atoi(optarg); break;
 279                 }
 280         }
 281         if (optind + 2 >= argc) {
 282                 fprintf(stderr, "\n");
 283                 fprintf(stderr, "Usage:   samtools merge [-nr] [-h inh.sam] <out.bam> <in1.bam> <in2.bam> [...]\n\n");
 284                 fprintf(stderr, "Options: -n       sort by read names\n");
 285                 fprintf(stderr, "         -r       attach RG tag (inferred from file names)\n");
 286                 fprintf(stderr, "         -u       uncompressed BAM output\n");
 287                 fprintf(stderr, "         -f       overwrite the output BAM if exist\n");
 288                 fprintf(stderr, "         -1       compress level 1\n");
 289                 fprintf(stderr, "         -@ INT   number of BAM compression threads [0]\n");
 290                 fprintf(stderr, "         -R STR   merge file in the specified region STR [all]\n");
 291                 fprintf(stderr, "         -h FILE  copy the header in FILE to <out.bam> [in1.bam]\n\n");
 292                 fprintf(stderr, "Note: Samtools' merge does not reconstruct the @RG dictionary in the header. Users\n");
 293                 fprintf(stderr, "      must provide the correct header with -h, or uses Picard which properly maintains\n");
 294                 fprintf(stderr, "      the header dictionary in merging.\n\n");
 295                 return 1;
 296         }
 297         if (!(flag & MERGE_FORCE) && strcmp(argv[optind], "-")) {
 298                 FILE *fp = fopen(argv[optind], "rb");
 299                 if (fp != NULL) {
 300                         fclose(fp);
 301                         fprintf(stderr, "[%s] File '%s' exists. Please apply '-f' to overwrite. Abort.\n", __func__, argv[optind]);
 302                         return 1;
 303                 }
 304         }
 305         if (bam_merge_core2(is_by_qname, argv[optind], fn_headers, argc - optind - 1, argv + optind + 1, flag, reg, n_threads) < 0) ret = 1;
 306         free(reg);
 307         free(fn_headers);
 308         return ret;
 309 }
 310
 311 typedef bam1_t *bam1_p;
 312
 313 static inline int bam1_lt(const bam1_p a, const bam1_p b)
 314 {
 315         if (g_is_by_qname) {
 316                 int t = strnum_cmp(bam1_qname(a), bam1_qname(b));
 317                 return (t < 0 || (t == 0 && (((uint64_t)a->core.tid<<32|(a->core.pos+1)) < ((uint64_t)b->core.tid<<32|(b->core.pos+1)))));
 318         } else return (((uint64_t)a->core.tid<<32|(a->core.pos+1)) < ((uint64_t)b->core.tid<<32|(b->core.pos+1)));
 319 }
 320 KSORT_INIT(sort, bam1_p, bam1_lt)
 321
 322 static void sort_blocks(int n, int k, bam1_p *buf, const char *prefix, const bam_header_t *h, int is_stdout)
 323 {
 324         char *name, mode[3];
 325         int i;
 326         bamFile fp;
 327         ks_mergesort(sort, k, buf, 0);
 328         name = (char*)calloc(strlen(prefix) + 20, 1);
 329         if (n >= 0) {
 330                 sprintf(name, "%s.%.4d.bam", prefix, n);
 331                 strcpy(mode, "w1");
 332         } else {
 333                 sprintf(name, "%s.bam", prefix);
 334                 strcpy(mode, "w");
 335         }
 336         fp = is_stdout? bam_dopen(fileno(stdout), mode) : bam_open(name, mode);
 337         if (fp == 0) {
 338                 fprintf(stderr, "[sort_blocks] fail to create file %s.\n", name);
 339                 free(name);
 340                 // FIXME: possible memory leak
 341                 return;
 342         }
 343         free(name);
 344         bam_header_write(fp, h);
 345         for (i = 0; i < k; ++i)
 346                 bam_write1_core(fp, &buf[i]->core, buf[i]->data_len, buf[i]->data);
 347         bam_close(fp);
 348 }
 349
 350 /*!
 351   @abstract Sort an unsorted BAM file based on the chromosome order
 352   and the leftmost position of an alignment
 353
 354   @param  is_by_qname whether to sort by query name
 355   @param  fn       name of the file to be sorted
 356   @param  prefix   prefix of the output and the temporary files; upon
 357                            sucessess, prefix.bam will be written.
 358   @param  max_mem  approxiate maximum memory (very inaccurate)
 359
 360   @discussion It may create multiple temporary subalignment files
 361   and then merge them by calling bam_merge_core(). This function is
 362   NOT thread safe.
 363  */
 364 void bam_sort_core_ext(int is_by_qname, const char *fn, const char *prefix, size_t max_mem, int is_stdout)
 365 {
 366         int n, ret, k, i;
 367         size_t mem;
 368         bam_header_t *header;
 369         bamFile fp;
 370         bam1_t *b, **buf;
 371
 372         g_is_by_qname = is_by_qname;
 373         n = k = 0; mem = 0;
 374         fp = strcmp(fn, "-")? bam_open(fn, "r") : bam_dopen(fileno(stdin), "r");
 375         if (fp == 0) {
 376                 fprintf(stderr, "[bam_sort_core] fail to open file %s\n", fn);
 377                 return;
 378         }
 379         header = bam_header_read(fp);
 380         buf = (bam1_t**)calloc(max_mem / BAM_CORE_SIZE, sizeof(bam1_t*));
 381         // write sub files
 382         for (;;) {
 383                 if (buf[k] == 0) buf[k] = (bam1_t*)calloc(1, sizeof(bam1_t));
 384                 b = buf[k];
 385                 if ((ret = bam_read1(fp, b)) < 0) break;
 386                 mem += ret;
 387                 ++k;
 388                 if (mem >= max_mem) {
 389                         sort_blocks(n++, k, buf, prefix, header, 0);
 390                         mem = 0; k = 0;
 391                 }
 392         }
 393         if (ret != -1)
 394                 fprintf(stderr, "[bam_sort_core] truncated file. Continue anyway.\n");
 395         if (n == 0) sort_blocks(-1, k, buf, prefix, header, is_stdout);
 396         else { // then merge
 397                 char **fns, *fnout;
 398                 fprintf(stderr, "[bam_sort_core] merging from %d files...\n", n+1);
 399                 sort_blocks(n++, k, buf, prefix, header, 0);
 400                 fnout = (char*)calloc(strlen(prefix) + 20, 1);
 401                 if (is_stdout) sprintf(fnout, "-");
 402                 else sprintf(fnout, "%s.bam", prefix);
 403                 fns = (char**)calloc(n, sizeof(char*));
 404                 for (i = 0; i < n; ++i) {
 405                         fns[i] = (char*)calloc(strlen(prefix) + 20, 1);
 406                         sprintf(fns[i], "%s.%.4d.bam", prefix, i);
 407                 }
 408                 bam_merge_core(is_by_qname, fnout, 0, n, fns, 0, 0);
 409                 free(fnout);
 410                 for (i = 0; i < n; ++i) {
 411                         unlink(fns[i]);
 412                         free(fns[i]);
 413                 }
 414                 free(fns);
 415         }
 416         for (k = 0; k < max_mem / BAM_CORE_SIZE; ++k) {
 417                 if (buf[k]) {
 418                         free(buf[k]->data);
 419                         free(buf[k]);
 420                 }
 421         }
 422         free(buf);
 423         bam_header_destroy(header);
 424         bam_close(fp);
 425 }
 426
 427 void bam_sort_core(int is_by_qname, const char *fn, const char *prefix, size_t max_mem)
 428 {
 429         bam_sort_core_ext(is_by_qname, fn, prefix, max_mem, 0);
 430 }
 431
 432
 433 size_t bam_sort_get_max_mem(char *max_mem_string)
 434 {
 435         char c;
 436         size_t max_mem;
 437         size_t multiplier=1;
 438         c=max_mem_string[strlen(max_mem_string)-1];
 439         switch(c) {
 440         case 'G':
 441                 multiplier*=1024;
 442         case 'M':
 443                 multiplier*=1024;
 444         case 'K':
 445                 multiplier*=1024;
 446         case 'B':
 447                 max_mem_string[strlen(max_mem_string)-1]='\0';
 448                 break;
 449         default:
 450                 break;
 451         }
 452         max_mem = multiplier * atol(max_mem_string);
 453         // max_mem should be checked that it was not zero after atol!
 454         return max_mem;
 455 }
 456
 457 int bam_sort(int argc, char *argv[])
 458 {
 459         size_t max_mem = 500000000;
 460         int c, is_by_qname = 0, is_stdout = 0;
 461         while ((c = getopt(argc, argv, "nom:")) >= 0) {
 462                 switch (c) {
 463                 case 'o': is_stdout = 1; break;
 464                 case 'n': is_by_qname = 1; break;
 465                 case 'm': max_mem = bam_sort_get_max_mem(optarg); break;
 466                 }
 467         }
 468         if (optind + 2 > argc) {
 469                 fprintf(stderr, "Usage: samtools sort [-on] [-m <maxMem>] <in.bam> <out.prefix>\n");
 470                 return 1;
 471         }
 472         bam_sort_core_ext(is_by_qname, argv[optind], argv[optind+1], max_mem, is_stdout);
 473         return 0;
 474 }